目的:近些年来肺癌的发病率与死亡率在逐年增长,不仅严重危害人类的健康,还对社会经济造成了一定的负担。肺癌的治疗手段有手术、放化疗、靶向药物、免疫治疗、中药治疗等。但由于大多数肺癌患者早期症状不明显,导致一经发现多数患者已发展至中晚期并伴有转移,手术机会少,效果差。放化疗及靶向治疗是目前应用较多的方法,但5年生存率并不理想。氢气作为近几年炙手可热的医疗气体,具有抗炎、抗氧化、抗癌等作用,目前已发现对多种疾病具有治疗作用,本研究旨在探索氢气对人肺癌A549及NCI-H1975细胞凋亡的作用,并深入探讨STAT3/Bcl2信号通路在其中扮演了一个怎样的角色。方法:1.使用不同浓度的H2(20%、40%、60%)干预处于对数生长期的肺癌A549、NCI-H1975细胞,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot(WB)技术检测凋亡相关蛋白。2.使用WB技术检测STAT3、p-STAT3、Bcl2基因在对照组与氢气干预的肺癌A549、NCI-H1975细胞中的表达量。3.过表达STAT3基因,q PCR、WB检测转染效率,流式细胞仪检测细胞凋亡,WB技术检测凋亡相关蛋白。4.免疫组织化学检测p-STAT3、Bcl2基因在裸鼠肺癌A549细胞转移瘤组织中的表达,并比较氢气组、顺铂组与对照组的表达量。5.Tunel法检测对照组、氢气组、顺铂组的细胞凋亡。结果:1.不同浓度的氢气均可以促进肺癌A549、NCI-H1975细胞凋亡;2.与对照组相比氢气干预后的肺癌A549、NCI-H1975细胞STAT3的表达未见明显差异(P>0.05),p-STAT3、Bcl2表达有显著降低(P<0.05);3.过表达STAT3后,氢气促进肺癌A549、NCI-H1975细胞凋亡受到抑制(P<0.05);4.免疫组织化学方法检测裸鼠肺癌A549细胞转移瘤组织中p-STAT3、Bcl2的表达,与对照组相比,氢气组与顺铂组的表达有显著的下降趋势(P<0.05);5.Tunel法检测裸鼠肺癌A549细胞转移瘤组织,与对照组相比,氢气组与顺铂组的细胞凋亡有显著的增高(P<0.05)。
结论:1.氢气具有促进肺癌A549、NCI-H1975细胞凋亡的作用。2.氢气通过抑制STAT3/Bcl2通路可以促进肺癌A549、NCI-H1975细胞的凋亡,过表达STAT3可降低氢气促进肺癌细胞凋亡的作用。
