随着社会发展,慢性肾脏病日益成为影响数百万人的世界性公共卫生问题,且近年来发病率迅速增加。在中国大陆,慢性肾脏病发病率约10.8%,我国约有1.3亿慢性肾脏病患者。慢性肾脏病持续进展的共同结局即终末期肾脏病。终末期肾脏病患者需采取肾脏替代治疗,目前主要的肾脏替代治疗手段包括血液透析、腹膜透析和肾移植。腹膜透析因其较高的早期存活率,良好的残余肾功能保护作用,对心血管系统影响小,避免反复的血管穿刺等优点被越来越多的患者选择。中国研究数据服务平台CNRDS的数据显示,2019年腹膜透析的在透患者为103348人,数量比2012年增长了近两倍。尽管腹膜透析明显改善了终末期肾脏病患者的预后,但仍存在诸多并发症,最终造成腹膜透析技术失败。腹膜透析液中葡萄糖降解产物的积累触发氧化应激,从而导致腹膜发生间皮间充质转变,腹膜功能障碍将影响腹膜超滤功能。根据国际腹膜透析协会规定,2000ml 4.25%的葡萄糖透析液留腹4h后超滤量小于400ml即为超滤衰竭。超滤衰竭是腹膜透析的严重并发症之一,目前临床上能够改善或者治疗超滤衰竭的手段非常匮乏。分子氢具有良好的抗氧化应激和抗炎症反应作用,且潜水医学研究证明,治疗剂量数百倍的氢气对人体也是安全的,已被广泛应用于多种疾病的治疗。饮用富氢水能减轻草酸盐诱导的结晶肾损伤,在高糖诱导的腹膜纤维化模型中,分子氢能有效抑制腹膜间皮细胞向间充质细胞转变,减少不良事件的发生。本研究将探讨分子氢对腹膜透析患者腹膜超滤功能的影响。第一部分单中心腹膜透析患者透析充分性和超滤功能的回顾性研究目的:研究单中心腹膜透析人群随着透龄增加透析充分性和腹膜超滤功能的改变。
方法:对长海医院腹膜透析中心1996年8月至2021年3月期间随访数据完整的病例进行回顾性分析,分别记录每位患者随访期内的尿素清除指数、超滤量及腹膜平衡试验结果,记录患者生存状况。根据患者年龄、性别、原发疾病分为不同组别,研究单中心腹膜透析人群的透析充分性及超滤功能变化,并绘制生存曲线。结果:共收集数据完整的病例735例,其中男性412人,女性323人,平均年龄53.31±15.55岁。患者平均起始尿素清除指数为2.2,透析第60个月平均尿素清除指数为1.8,第100个月后波动于1.7～2.1之间;平均起始超滤量为+155ml,透析第100个月时升至+800ml,第100个月后超滤量逐渐下降,第174个月时,超滤量为+570ml;D/Pcr在透析第0～150个月之间始终围绕0.65波动;高平均转运+高转运患者在透析起始状态所占比例为46.77%,透析第123个月,高平均转运+高转运患者所占比例为53.85%,透析第168个月后,高平均转运+高转运患者所占比例为100%。老年、男性、糖尿病患者生存曲线较其他人群下降更快(P<0.05)。结论:随着患者透龄增加,腹膜透析患者存在透析充分性和超滤功能的减退,其中老年、男性、糖尿病群体面临更大的风险。第二部分长程氢气吸入对腹膜透析超滤功能的影响目的:观察长程氢气吸入对腹膜透析超滤功能的影响。方法:入组符合条件的腹膜透析患者予以氢气吸入,流量为300ml/min,氢气体积分数为99.82%,时间为6h/日,持续1年,同时予以基础治疗。对比吸氢前后患者超滤量的变化,流出液中血管内皮生长因子A和血小板衍生生长因子BB浓度的变化。
结果:腹膜透析患者平均吸氢8.6周后超滤量增加中位数为80ml,吸氢16.8周后超滤量增加中位数为125ml。腹膜透析引流液中血管内皮生长因子A基线浓度中位数为383.90 pg/ml,吸氢8.6周后浓度中位数为224.80 pg/ml,吸氢16.8周后浓度中位数为121.40 pg/ml;腹膜透析引流液中血小板衍生生长因子BB基线浓度中位数为72.75 pg/ml,吸氢8.6周后浓度中位数为40.90 pg/ml,吸氢16.8周后浓度中位数为39.65 pg/ml。结论:吸氢能够改善超滤功能,减少腹膜血管新生。第三部分分子氢改善腹膜透析超滤功能的实验研究目的:探讨分子氢改善腹膜透析超滤功能的相关机制,为超滤衰竭的预防和治疗提供新的靶点。方法:将24只7～8周龄的C57BL/6J小鼠随机分为氯化镁组(镁离子对照)、高糖+氯化镁组(模型)、高糖+氢化镁组(治疗)、氢化镁组(正常对照)。高糖干预方式为4.25%高糖腹膜透析液2ml腹腔注射,氯化镁干预方式为183mg/kg氯化镁溶液0.1ml灌胃,氢化镁干预方式为50mg/kg氢化镁悬浊液0.1ml灌胃(产氢2.125ml),持续28天,构建高糖诱导的腹膜透析功能障碍模型。进行病理染色测量各组小鼠腹膜间皮下厚度,计算Masson染色胶原容积分数。通过腹膜重吸收实验评估小鼠腹膜功能。通过免疫组化检测不同来源腹膜组织的PTEN表达情况。应用生物信息学分析预测Lnc RNA GAS5作用于PTEN的靶点,并在Met-5A细胞中构建过表达或干扰GAS 5表达的细胞株,验证GAS 5对PTEN的作用,探索分子氢改善腹膜透析超滤功能的可能机制。
结果:高糖刺激后,间皮下厚度中位数为78.38nm,而在给予分子氢干预后,间皮下厚度中位数为23.03nm。高糖刺激后,腹膜胶原容积分数中位数为41.6%,分子氢干预后,腹膜胶原容积分数中位数为20.0%。腹膜重吸收实验中高糖+氯化镁组重吸收率为76.00±21.10%,高糖+氢化镁组为91.50±2.30%。高糖刺激下腹膜PTEN表达量降低,分子氢干预后PTEN表达回调,GAS5与PTEN同向变化。GAS5通过竞争性结合mi R-23a-3p调控PTEN在腹膜组织上的表达。结论:吸氢能够减轻高糖诱导的腹膜纤维化,并改善腹膜重吸收功能。分子氢能部分逆转高糖刺激下PTEN的下调,这一分子机制可能是GAS5/mi R-23a-3p/PTEN的ce RNA作用介导的。
