临床研究｜氢气水可明显改善乙肝患者的肝功能
这是一篇2013年发表在国际著名期刊《临床与转化医学》的研究论文，题目是：富氢水对慢性乙型肝炎患者氧化应激，肝功能和病毒载量的影响。
研究结果表明，常规改善组的氧化应激保持不变，而氢改善组则明显改善。氢气水的改善后，肝功能明显改善，HBV DNA明显降低。尽管改善后两组之间的氧化应激存在显着差异，但改善后肝功能和HBV DNA水平相当，且趋势均有改善。
介绍
乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的潜在威胁生命的肝脏感染，是全球主要的健康问题，也是最严重的病毒性肝炎类型。
根据世界卫生组织的统计，全世界估计有20亿人感染了HBV，超过2.4亿人患有慢性肝感染。由于乙型肝炎的急性或慢性后果，每年约有60万人死亡。乙型肝炎在中国和亚洲其他地区是地方性流行。
在中国，大约有9300万慢性HBV感染患者，其中2000万患有慢性乙型肝炎(CHB)。但是，肝炎的发病机理仍知之甚少。
迄今为止，已经发现氧化应激在肝炎的发病机理中起重要作用。反应性氧物质(ROS)和诱导的ROS的脂质过氧化(LPO)涉及病毒性肝炎的病理学和已被视为肝损伤的一个主要原因。研究已证实在慢性乙肝患者的氧化还原失衡。
2007年，大泽等人。发现氢可通过选择性还原包括羟基自由基(·OH)和过氧亚硝酸盐(ONOO –)在内的细胞毒性氧自由基来作为改善性抗氧化剂。
在以前的研究中，已经发现，在许多动物模型中，吸入氢气以及腹膜内和口服给予富氢水都可以起到保护作用，包括缺血/再灌注损伤和许多器官的炎症。然而，氢对病毒诱导的炎症包括肝炎的保护作用尚未迄今报道。
这项研究旨在研究富氢水对氧化应激(超氧化物歧化酶[SOD];谷胱甘肽S转移酶[GST];黄嘌呤氧化酶[XOD];丙二醛[MDA])，肝功能(丙氨酸氨基转移酶[ALT])的影响。 CHB患者的总胆汁酸[TbiL]，胆碱酯酶[ChE])和HBV负荷。
这项研究可为富氢水在CHB改善中的临床应用提供证据。
主题与方法
选题集
招募了三十名进行常规身体检查的健康受试者(男25例;女5例)作为对照。他们没有影响心脏，肝脏，肾脏和肺等重要器官的系统疾病。肝，肾功能正常，无病毒性肝炎或不是病毒性肝炎的携带者。平均年龄为35.8±12.2岁(范围：20-55岁)。
纳入标准：从2010年8月至2010年9月，招募了中度CHB住院患者(n = 60)。男性49例，女性11例。这些患者被随机分为氢气改善组或常规改善组(每组n = 30)。CHB的诊断基于慢性乙型肝炎的预防和改善指南。2
排除标准：排除甲，丙，丁和戊型肝炎，酒精性肝炎，药物性肝炎和自身免疫性肝炎。排除了肿瘤，血液病，心脏病，高血压，甲状腺功能亢进症，糖尿病，妊娠，肝硬化和神经精神疾病。常规改善组男24例，女6例，平均年龄36.8±15.2岁。在氢改善组中，男25例，女5例，平均年龄35.3±11.1岁。
这是一项对照，随机，盲目的研究。整个研究方案经淮安市第四人民医院伦理委员会批准，研究前已获得知情同意书。
改善
在常规改善组中，患者接受常规改善，并在设计的时间点向患者施用无氢水。在氢改善组中，除常规改善外，每天连续六周(每天1200-1800毫升)口服三次富含氢的水(上午8-9点;下午14-15点;下午18-19点)。9
所有受试者在研究前1周内未接受其他抗氧化剂改善。在改善6周之前和之后的早晨，采集空腹静脉血(4 mL)。以3,000 rpm离心5分钟后，收集血清并将其保存在–70°C下以备后用。
制备富氢水
通过将金属镁棒放入饮用水(Mg + 2H 2 O→Mg(OH)2 + H 2)中来生产富氢水;最终氢浓度：0.55-0.65 mM。镁棒在聚丙烯和陶瓷容器中包含99.9%的纯金属镁和天然宝石。9，10
检测
用XOD法检测SOD活性，用化学比色法检测GST和XOD，用硫代巴比妥酸比色法检测MDA。试剂购自南京建城生物技术有限公司(中国南京)，并根据制造商的说明进行检测。
实时荧光定量PCR
使用热循环仪(ABI 5700; Applied Biosystems，美国加利福尼亚州福斯特市)进行了实时荧光定量PCR，以测量HBV DNA(20120114;大安基因生物技术有限公司，中国广州)。检测下限为10 3拷贝/ mL。
肝功能检测
ALT，TbiL和ChM用自动生化分析仪(TBA-120R;日本东芝，日本东京)测量，试剂(编号：12125)购自Whiteman Biotech Co.，Ltd.(中国，南京)。根据制造商的说明进行检测。
统计分析
使用Windows的SPSS 16.0版(SPSS，Chicago，IL，美国)进行统计分析。定量数据表示为平均值±标准偏差(骨灰盒：x-wiley：17528054：cts12076：equation：cts12076-math-0001x± s)。
三组之间的比较是通过方差分析进行的，随后是事后检验和纽曼-基尔斯检验。但是，氢改善组与常规改善组之间的比较是通过t检验进行的。定性数据以百分比表示，并用卡方检验进行检验。p <0.05的值被认为具有统计学意义。
结果
两组患者基线时的特征
总共招募了185名CHB患者，其中101名符合纳入标准。然后，将84例患者随机分为常规改善组(n = 41)和氢改善组(n = 43)。
在研究结束时，常规改善组的30例患者和氢气改善组的30例患者被纳入最终分析(图 1)。表 1显示了CHB患者的特征。在常规改善组和氢改善组之间，基线时的性别，年龄，HBeAg阳性率，ALT和HBV DNA水平无明显差异。此外，对照组和CHB患者在基线时的人口统计学无显着差异。
表1. 常规改善组和氢改善组中基线CHB患者的特征
患者招募流程图。
不同组氧化应激相关参数的变化
如表 2所示，健康受试者与CHB患者改善前后SOD，GST，MDA和XOD的差异显着(p <0.01)。这些参数在健康受试者和常规改善组中保持不变。
此外，与处理前相比，氢处理后SOD和GST活性显着增加，MDA和XOD活性显着下降(p <0.01)。此外，与常规改善组相比，改善后氢改善组的SOD和GST活性显着增加，MDA和XOD显着降低(p<0.01)。
值得注意的是，富氢水处理后的SOD和GST活性高于对照组。
表2. 不同组改善前后的氧化应激参数
注意
一个 p<0.05相对于对照组
b p<0.05与氢处理后
两组改善前后肝功能和HBV DNA
如表 3所示，CHB患者的ALT，TBiL和ChE与改善前健康受试者的ALT，TBiL和ChE显着不同。
表3. 不同组改善前后的肝功能和HBV DNA
注意
一个 p<0.05与前改善。
在CHB患者中，改善后ALT和TBiL降低，ChE显着升高(p <0.01或0.05)。与常规改善组相比，氢改善组的肝功能保持相对不变(p > 0.05)，尽管ALT和TBiL略有降低，而ChE则略有增加。
改善后，尽管氢改善组中的HBV DNA降低了一定程度，但氢改善组中的HBV DNA 与常规改善组相当(p > 0.05)。
讨论区
我们的结果表明，富氢水处理可以改善CHB患者的氧化应激，并且在接受氢综合改善后，肝功能以及HBV DNA负荷有改善的趋势。
在CHB中，肝细胞损伤的潜在机制很复杂，涉及炎症和免疫诱导的损伤，其中ROS起重要作用。ROS包括超氧阴离子，单线态氧，羟基自由基，以及其他。
已发现ROS和活性氮物质(RNS)归因于包括病毒性肝炎在内的多种肝脏疾病中的肝损伤。4项研究表明，氧化应激(ROS，RNS)增加，但抗氧化能力是在患者的丙型肝炎损害。
此外，丙型肝炎患者具有增加的LPO在血清，肝脏和外周血单核细胞，谷胱甘肽降低，但血清和肝脏中的谷胱甘肽升高。在不同病理分期，LPO的程度也是不同的，并且已被发现涉及到肝炎的发病机理。
这些结果证实，氧化应激是病毒性肝炎的发病机理的主要贡献者，这在本研究中也被证实为XOD和MDA(LPO的产物)增加而SOD和GST活性降低。由于病毒性肝炎患者存在氧化/抗氧化失衡，因此改善氧化应激可能成为改善病毒性肝炎的有前途的策略。
尽管众多的抗氧化剂(包括天然和合成的抗氧化剂已被鉴定)，有抗氧化剂的乙型肝炎，改善中的应用尚未达成共识和一些抗氧化剂的具有可能的有害影响。
此外，在患有肝病或肝损伤的动物中，口服制剂生物利用度差仍然是一个挑战。因此，在临床改善乙型肝炎时必须开发无副作用或副作用最小的抗氧化剂。
近来，已经证实氢在与氧化应激有关的许多疾病中具有有效的抗氧化能力。2007年，Ohasawa等人。7首次发现氢可以选择性中和·OH和ONOO –，两个对组织损伤至关重要的自由基，对其他自由基没有影响。
氢作为一种理想的抗氧化剂，具有一些优势：它可以穿透生物膜并扩散到细胞质，线粒体和细胞核中，从而能够保护核DNA和线粒体。
氢的产物是水，使用氢不应有严重的不良副作用;氢足够温和，不会干扰代谢氧化/还原反应或破坏细胞信号传导中涉及的ROS。另外，氢的收集相对容易，这使得氢处理便宜。
此外，尽管没有明显差异，但接受氢改善的患者与接受常规改善的患者相比，肝功能和HBV DNA水平的趋势有所改善。这可能归因于氢气的短期处理。因此，需要进一步进行长期用富氢水处理的研究，以确认氢对肝功能的保护作用及其对病毒复制的抑制作用。
总之，富含氢的水可能会减轻氧化应激，并有可能改善CHB患者的肝功能并降低HBV DNA水平。
致谢
这项研究得到了国家自然科学基金(No. 81000493 / H0906)和上海市卫生局青年计划(No：2010Y0503)的支持。
夏春祥医师
首次发表： 2013年6月13日 https://doi.org/10.1111/cts.12076
以上内容摘自《孙学军 氢思语》，仅限于知识科普，不代表对本公司产品的宣传。
