呼吸氢气对实验性自身免疫性脑脊髓炎动物的治疗作用
呼吸氢气对实验性自身免疫性脑脊髓炎动物的治疗作用
中枢神经系统炎性细胞的浸润和大范围的髓鞘脱失以及轴索损伤是多发性 硬化和实验性自身免疫性脑脊髓炎的病理学特点。氢气作为一种新型抗氧化剂越来越 受到人们重视。本实验拟采用实验性自身免疫性脑脊髓炎动物为研究对象,通过给与 高浓度氢气吸入方式,探讨氢气对于实验性自身免疫性脑脊髓炎动物的治疗作用。
氢气是自然界中一种无色无味的气体。近年来发现氢气具有选择性抗氧化作用, 因为安全简单,可能适用于多种急慢性病的治疗。由于氢气分子量小且缺乏极性,使 得氢分子具有强大的组织扩散能力,可迅速穿过血脑屏障抵达中枢神经系统。但扩散 能力强也容易降低氢气的体内存留时间和剂量,采用吸入氢气的方法可保证在体存留 时间和给气剂量,对于发挥氢气的治疗作用有其独特的优势。
方法:建立实验性自身免疫性脑脊髓炎动物模型,采用随机数字表法共分为 4 组 (n=12):正常组(Ctrl 组),实验性自身免疫性脑脊髓炎组(EAE 组),实验性自身 免疫性脑脊髓炎吸入高浓度氢气组(EAE+HCH 组),实验性自身免疫性脑脊髓炎吸 入氮氧混合气组(EAE+HCN 组)。EAE+HCH 组和 EAE+HCN 组小鼠自致免后第 12 天开始每日吸入氢氧混合气或氮氧混合气 2 个小时。每日进行神经行为学评分和体重 称量;致免后第 21 天进行老鼠处死和组织取材的工作,采用 H&E 染色和勒克斯速蓝 (Luxol fast blue, LFB)染色进行组织形态学的观察评分;采用免疫组化方法观察脊髓中 T 细胞数量的变化;通过酶联免疫吸附试验检测脊髓匀浆裂解液中炎性因子含量改变。
结果:与 Ctrl 组相比,EAE 组第 9 天开出现尾部肌肉张力丧失,逐渐扩散到单或 双下肢,同时伴随体重下降,组织形态学观察到中枢神经系统腰膨大部分炎性细胞浸 润和大量脱髓鞘和轴索损伤,相同切片区域中大量 CD4+ T 细胞浸润,脊髓裂解液中 炎性因子 TNF-α、IFNγ 和 IL-1β 含量升高;与 EAE 组相比,EAE+HCN 组各种检测 指标均未见明显改变;与 EAE 组相比,EAE+HCH 组神经行为学和体重缺失有所缓 解,中枢神经系统炎性细胞浸润和脱髓鞘情况得到明显改善,T 细胞数量减少,炎性 因子 TNF-α、IFNγ 和 IL-1β 含量降低而抗炎因子 IL-10 含量升高。
结论:氢气吸入能改善中枢神经系统炎性细胞浸润和脊髓髓鞘脱失,减少中枢神 经系统 T 细胞浸润,降低中枢神经系统炎症水平。结果显示,吸入高浓度氢气对实验 性自身免疫性脑脊髓炎具有治疗效应。